我做了他的蛋白质标签。His- Tag标注的方法是什么？组氨酸标签(Histidinetag)是基因工程构建的纯化标签中最受欢迎的标记之一，是在蛋白质氨基末端添加6~10个组氨酸的能力，在正常或变性条件下(如8M尿素)可与Ni2 螯合柱紧密结合。
a .影响非特异性结合的因素很多，针对不同的免疫原可以优化阻断条件。没有通用的封闭溶液，因为每个抗原抗体反应都有独特的性质。b .选择外壳时，最重要的标准是信噪比。封闭条件不足会导致背景噪音过大，而封闭条件过大会导致信号较弱；c)可根据不同的检测系统(碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶)和蛋白质性质(分子量)选择合适的封闭剂和缓冲液(PBS或TBS)。
Histag:组氨酸标签，基因工程构建的纯化标签中最受欢迎的标签之一，是在蛋白质的氨基末端加上6~10个组氨酸，凭借其与Ni2 螯合柱紧密结合的能力，在正常或变性条件下(如8M尿素)用咪唑洗脱，或降低pH至5.9使组氨酸充分质子化，从而不再与Ni2 结合。组氨酸标签。它能与多种金属离子相互作用，包括Ca2 、Mg2 、Ni2 、Co2 等。其中镍离子的应用最为广泛。
由于组氨酸肽与二价金属离子(镍、锌等)的螯合作用。)，方便用金属螯合亲和层析纯化蛋白质，融合蛋白也可以通过抗组氨酸肽片段的抗体来检测。6组氨酸的肽可以缩写为6×His，扩展资料:组氨酸被认为是人类必需氨基酸，主要是儿童必需氨基酸。经过多年的发展，人类开始自行合成，此时它变成了一种不必要的氨基酸，在慢性尿毒症患者的饮食中加入少量的组氨酸，可以增加氨基酸结合成血红蛋白的速度，减少肾性贫血，所以组氨酸也是尿毒症患者的必需氨基酸。
